猪繁殖和呼吸综合征（PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome），又称蓝耳病，是由动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种病毒性传染病，是一种以导致母猪发热、厌食、早产、流产、死胎等繁殖障碍及仔猪高死亡率和育成猪呼吸困难、发育迟缓为特征的疫病（图1、2）。该病自发现以来己给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失。

图1患病母猪产死胎

图2患病母猪流产

自上个世纪90年代分离到PRRSV，该病已经遍布我国各个省区（Anetal.,;Chenetal.,;Gaoetal.,;Yinetal.,）。我国台湾于年发现有该病存在，年该病在北京及周边地区大规模暴发，随后该病不断蔓延到全国各地，尤其是自年以来，出现变异株，造成我国约万头猪只死亡。病原分离结果表明该病毒为发生变异的PRRSV，即现在所说的高致病性PRRSV（HP-PRRSV）。年后由高致病性蓝耳病毒引起的蓝耳病广泛存在，多呈地方性流行。目前我国高致病性蓝耳病毒对猪的致病性仍然很高，而且感染猪群的发病率和死亡率也很高。

关于蓝耳病，它是一个国际性的问题，都是“猪第一大病毒性传染病”，尤其对养猪业发达的国家和地区造成了巨大的打击。再加上病毒变异速度快，强毒力毒株不断变异产生，对该病的防控提出了很大的挑战(CheonandChae,)。那么，问题来了，面对蓝耳病这种国际性的困惑，我们又该如何解决这种猪场“天下一片蓝”的局面呢？

如何有效防控蓝耳病？

鉴于PRRSV的生物学特性和流行病学特征，对于该病的消灭难度很大，我国国家动物疫病防控中长期规划中指出，在我国原种猪场净化PRRS，给我们的防控提出了目标。目前该病尚无有效治疗手段，预防是关键。减少或阻断传染源，做好养殖场生物安全措施，并进行疫苗免疫提高机体免疫力是目前防控该病的有效措施。

在控制传染源和生物安全方面，首先要引种检疫。健康猪群应自繁自养，建立全进全出制度，不从疫区引进种猪、猪精液等。从非疫区引进活畜要严格检疫，并配以进行血清学与病毒学检测，合群前应隔离观察8周以上。加强饲养管理，控制畜舍饲养密度，通风良好，温湿度适宜，同时做好消蚊灭鼠工作。对猪场饲养与防疫人员做好培训工作，强制出入人员淋浴，更换服装，做好清洁与运输工具的消毒工作，切断间接传播途径。

建立有效的免疫防疫工作是做好PRRS防控的重要措施之一，在疫情复杂地区尤为重要。尽管我国现已取消采用强制免疫来预防和控制猪繁殖与呼吸障碍综合征，然而，接种疫苗依然是控制PRRS的有效措施，灭活苗与活疫苗均已被用于仔猪、育肥猪与母猪来预防控制PRRS的发生与流行（Corzoetal.,）。

然而幸运的是，硕腾公司在年上市的高致病性蓝耳病疫苗—“瑞兰安”就能够有效防控蓝耳病的发生，真是养猪界的福音啊！现在我们先通过下面一组数据来一睹为快，瞅瞅它的优势到底在哪里（表1）？

背景介绍：某猪场试用“瑞兰安”免疫了1栋猪舍的猪群，该猪群在常见发病的70~80日龄不再出现发病，猪群的整齐度、生长速度改善非常明显，其和试用“瑞兰安”免疫前9个月每栋猪舍猪群的发病率、死淘率对比情况见表1。自从该场开始全面使用“瑞兰安”免疫猪群，至今每批猪都和年9月份的试验猪一样，70~80日龄猪只没有再出现高比例发病的现象，猪群的整齐度、生长速度明显提高（图3、图4）。

表1试用“瑞兰安”免疫的猪群和试用“瑞兰安免疫前9个月每栋猪舍猪群的发病率、死淘率对比情况

图3免疫“瑞兰安”后育肥猪的健康度改善明显

图4免疫“瑞兰安”后育肥猪的整齐度好

“瑞兰安”是根据中国目前蓝耳病流行毒株精心筛选出的高致病性蓝耳病自然缺失TJM-F92弱毒活疫苗株，是按照国际标准，优质原料和先进工艺生产的，也是国际上公认的防控蓝耳病最有效的方法之一。当然，需要指出的是，猪场疾病的防控是一个综合的工程，需采用综合防控技术来预防控制PRRS。

PRRSVTJM-F92毒株的显著特点是存在两段基因缺失，一是在其NSP2基因上比经典毒株缺失了90个核苷酸，第二段缺失是NSP2基因在缺失90个核苷酸的基础上同时还连续缺失了个核苷酸，即与经典的蓝耳病病毒相比，该毒株一共缺失了个核苷酸。近年相关科研人员开展了大量有关在疫苗毒和野毒NSP基因进行氨基酸插入与缺失的研究（Fangetal.,;Hanetal.,;Shenetal.,）。如此大片段的基因缺失，是否会改变其本身的毒力返强，有待于进一步的研究来证明。为此，中国农业科学院武华博士团队的夏铭崎博士开展了TJM-F92株的毒力返强试验。

TJM-F92株是否存在毒力返强？

TJM-F92株是通过将分离鉴定的TJ株强毒在Marc-上连续传代致弱92代（F92）获得的一株弱毒株，在传代弱化过程中每5～10代蚀斑克隆纯化病毒一次，至第19代（F19）时筛选到一株在NSP基因上连续缺失个核苷酸（个氨基酸）的毒株，该缺失从F19开始至F92一直稳定存在（Lengetal.,）。

研究者将PRRSVTJM-F92株基础种子免疫接种PRRS抗原、抗体阴性健康易感猪，采集病毒血症载毒高峰期的血清样品，继代接种PRRS抗原、抗体阴性健康易感猪进行5代毒力返强试验，并对返强第5代病毒（简称为“RTVF5”病毒）进行NSP2基因序列分析，检验PRRSVTJM-F92株的安全性及NSP2基因存在的个核苷酸在易感动物体内的稳定性。

将PRRSVTJM-F92基础种子接种健康易感动物，取病毒血症载毒高峰期血清样品作为继代接种物，连续在猪体内传5代。第1代至第5代试验猪在免疫观察期内未出现任何PRRS临床症状，直肠温度均正常。免疫后剖检观察，免疫组与对照组试验猪肺脏、淋巴结等脏器眼观无明显变化（图5）。对肺脏进行病理组织学检测，未见由间质性肺炎引起的损伤（图6）。研究结果表明，PRRSVTJM-F92株基础种子接种PRRS健康易感猪连续传代5代后未发生毒力返强。

图5返强1代至返强5代试验猪肺脏剖检图片

A.返强1代免疫组试验猪肺脏图片；B.返强1代对照组试验猪肺脏图片；C.返强2代免疫组试验猪肺脏图片；D.返强2代对照组试验猪肺脏图片；E.返强3代免疫组试验猪肺脏图片；F.返强3代对照组试验猪肺脏图片；G.返强4代免疫组试验猪肺脏图片；H.返强4代对照组试验猪肺脏图片；I.返强5代免疫组试验猪肺脏图片；J.返强代对照组试验猪肺脏图片

图6返强1代至返强5代试验猪肺脏HE染色图片（×）

A.返强1代免疫组试验猪肺脏病理切片；B.返强1代对照组试验猪肺脏病理切片；C.返强5代免疫组试验猪肺脏病理切片；D.返强5代对照组试验猪肺脏病理切片

国际上也有与夏铭崎博士同类的研究结果。Faaberg等在年的研究结果表明，NSP2基因缺失病毒动物体内繁殖能力减弱，不引起局部淋巴结肿胀，病毒毒力明显下降；Dal-Young等报道，应用反向遗传技术构建PRRSVP毒株的NSP2基因缺失个aa（~），基因缺失后，病毒毒力消失；而TJM株NSP2基因缺失个aa（~），TJM疫苗株缺失的与该文章报道缺失的区段大部分重叠，如图7所示。

图7P毒株的NSP2基因缺失与TJM毒株缺失的NSP2示意图

综上所述，将PRRSVTJM-F92株基础种子免疫接种PRRS抗原、抗体阴性健康易感猪，每代易感猪均未见临床异常。将PRRSVTJM-F92经猪体内连续传代五代后，在TJM-F92株NSP2区域存在的个氨基酸的缺失仍然存在，说明该缺失可在猪体内稳定遗传。以上试验结果表明PRRSVTJM-F92疫苗株无毒力返强风险。

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